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O USO DA ENDONUCLEASE CAS13 NOS EXAMES DE DETECÇÃO VIRAL
Camila Luísa Thiel, Manassés Alcantara Loureiro, Victor Henrique Souza Quariniri, Alexandre Ehrhardt

Última alteração: 29-10-2020

Resumo


O coronavírus ou COVID-19 ou Sars-CoV-2 teve seus primeiros casos relatados na província Wuhan na China no final de 2019, ele é um vírus de RNA de fita simples positiva, é pertencente à família dos CoVs mais precisamente do grupo β-CoVs, outros tipos de coronavírus já foram relatados como por exemplo Mers-CoV e o Sars-Cov mas que não tomaram a proporção do coronavírus, o Sars-CoV foi registrado como uma epidemia em 2002 e tem características semelhantes ao Sars-Cov-2. O covid-19 tem como porta de entrada para dentro do corpo a ligação de sua proteína Spike ao gene ACE2 humano interagindo com a angiotensina 2, levando assim o seu aumento, os principais sintomas são febre, tosse seca, cansaço, os casos mais graves podem acometer ou evoluir para dificuldade de respirar ou falta de ar, dor ou pressão no peito, perda de fala ou movimento. O presente trabalho tem como objetivo de demonstrar um novo método de diagnostico viral feito através da endunuclease cas 13 utilizando artigos pesquisados em base de dados Scielo, Google Acadêmico, Capes Periódicos, PubMed. A CRISPR ou conjunto de repetições palindrômicas curtas regularmente espaçadas é uma nova tecnologia que promete grandes avanços na ciência. A CRISPR é um sistema de defesa das bactérias, criando uma memória da infecção, que faz com que a célula se adapte e desenvolva mecanismos para combater o agente que causou a morte das bactérias anteriores. A CRISPR Cas13 é uma enzima que compõe este sistema, ela é usada para o diagnóstico de uma possível infecção viral no corpo por meio da detecção de RNA viral, podemos citar como exemplo o teste SHERLOCK desenvolvido por um grupo de pesquisadores, dentre eles estavam Feng Zhang, Omar Abudayyeh e Jonathan Gootenberg, este teste funciona da seguinte maneira, após a coleta de amostra do paciente que esteja com um provável caso de infecção viral o RNA do mesmo é ampliado, assim em seguida é adicionado a essa amostra reports sensíveis ao Cas13, ou seja, irão reagir quando a enzima fora ativada e logo após adicionam a enzima Cas13 programada com RNA guia viral, podemos usar como exemplo o RNA do Covid-19, o RNA viral é implantado no complexo CRISPR Cas13 gerando a memória da infecção e as enzimas dotadas com essa memória viral são implantadas na amostra do paciente, assim a Cas13 com a memória programada com RNA guia do RNA do covid-19 irá procurar o RNA Covid na amostra, quando encontrar ela irá se ligar no RNA do Covid,  assim a enzima irá começar a clivar esse RNA e assim os reports da Cas13 também serão clivados, ou seja, os reports da amostra que estiver com vírus serão cortados ao meio então logo após essa amostra é inserida em um teste de detecção de fluxo que é composta por duas fitas semelhante ao teste de gravidez, o paciente que não tiver Covid-19 os reports da Cas13 não serão clivados e ficaram presos na primeira fita atestando negativo e os pacientes que tiverem Covid-19 estes reports clivados pela ativação da enzima Cas13 ficarão presos na segunda fita assim atestando positivo.