Portal de Eventos da ULBRA., XVI FÓRUM DE PESQUISA CIENTÍFICA E TECNOLÓGICA

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ATIVIDADE ENZIMÁTICA E EXPRESSÃO DA UREASE EM PLANTAS DE SOJA SUBMETIDAS À HERBIVORIA
Roberta da Silva e Silva, Angela Menegassi, Daniel Strassburger, Celia Regina Carlini, Axel Mithöfer, Arlete Beatriz Becker Ritt

Última alteração: 30-08-2016

Resumo


Ureases são metaloenzimas dependentes de níquel, presentes em plantas, bactérias e fungos. Em vegetais, elas atuam na defesa contra fitopatógenos, principalmente fungos e bactérias, sendo sintetizadas pelas plantas em resposta ao ataque de patógenos. Apesar de estarem envolvidas no metabolismo e biodisponibilidade de nitrogênio, pouco se sabe sobre sua regulação em plantas. Na leguminosa Canavalia ensiformis uma família gênica de ureases foi induzida pelo ácido abscísico. Diante disso, o objetivo desse trabalho foi verificar a regulação da urease em plantas de soja submetidas a herbivoria. Sementes de soja da cultivar Williams 82 foram germinadas e  mantidas em câmaras de crescimento, com condições controladas, até atingir o estádio vegetativo V3. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado em esquema unifatorial com 5 repetições. Foi colocada uma lagarta de Spodoptera litorallis sobre a folha central da primeira folha trifoliolada em cada planta tratada. A lagarta permaneceu em contato com a folha por 2 horas a partir da primeira mordida. As folhas tratadas e as folhas das plantas controle foram excisadas e procedeu-se as extrações de proteínas totais e de RNA e a síntese de cDNA. As variáveis avaliadas foram atividade ureásica, pelo Método do fenol-nitroprussiato e a expressão relativa de urease foi calculada usando o método 2-ΔΔCq. Os resultados obtidos foram analisados estatisticamente pelo teste t com 95% de probabilidade. Para a variável atividade ureásica, não houve significância para os fatores de tratamento testados. Com relação a expressão das isoformas de urease, as amostras tratadas diferiram significativamente dos controles. Nas amostras tratadas houve uma superexpressão da urease ubíqua e uma supressão da urease embrião-específica quando comparadas às plantas controle. Nas condições de realização deste experimento, é possível concluir que o tratamento com a Spodoptera litorallis não interferiu na atividade ureásica, mas regulou a expressão dos genes da urease ubíqua e embrião-específica, sugerindo que a urease pode estar exercendo papel de defesa na planta.

Palavras-chave


urease; soja; herbivoria; qPCR.

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