Portal de Eventos da ULBRA., IX SALÃO DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA JÚNIOR

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MODULAÇÃO DO EFEITO DA OXALIPLATINA PELA CURCUMINA NA LINHAGEM CELULAR DE ADENOCARCINOMA COLORRETAL HUMANO HT-29
Gabriel Osório varriento, Luisa Lopes Machado, Lucas Umpierre Conter, Ivana Grivicich

Última alteração: 03-12-2021

Resumo


Caracterizado como uma neoplasia que acomete um segmento de intestino grosso e o reto, o câncer colorretal é o segundo mais frequente no Brasil, onde foram estimados 41.010 casos diagnosticados e sendo responsável por aproximadamente 20.576 óbitos no ano de 2020. O tratamento desse câncer inclui a ressecção cirúrgica do segmento acometido, radioterapia e quimioterapia. A oxaliplatina é um dos principais antineoplásicos utilizados para esse tipo câncer, porém alguns pacientes demonstram resistência a esse quimioterápico. Estudos buscam alternativas para superar a resistência adquirida e amenizar seu efeito tóxico em células normais. Estudos demonstram que a curcumina apresenta eficiente papel no combate ao câncer, regulando diversas vias de sinalização intracelular como fatores de transcrição, receptores, quinases, citosinas, enzimas e fatores de crescimento. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da combinação da oxaliplatina e a curcumina na linhagem de adenocarcinoma colorretal humano HT-29. Para atingir tal objetivo foi utilizada a linhagem celular HT-29, mantida em frascos de cultura de 25 cm2 com meio de cultura DMEM contendo L-glutamina 2% (p/v) e soro fetal bovino 10% (v/v). O estudo utilizou o ensaio colorimétrico de MTT ((3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) para determinar a citotoxicidade aguda e os valores de IC50, isto é, a quantidade necessária de agentes químicos para inibir 50% do crescimento celular. Neste ensaio, as células foram expostas aos tratamentos com os agentes isolados ou combinados por 48 h e a seguir foram coradas com MTT e analisadas em um leitor de placas em comprimento de onda de 540 nm. Afim de avaliar o efeito tardio da combinação dos agentes, foi utilizado o ensaio de formação de colônias, onde as células foram expostas aos compostos de forma isolada e combinada por 48 h e cultivadas por 7 dias em meio de cultura sem os tratamentos. A avaliação da apoptose foi realizada por citometria de fluxo utilizando um kit comercial (Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit), onde é possível identificar alterações de membrana que ocorrem durante a apoptose, através da ligação da Annexina V-FITC a receptores de membrana. Os resultados mostraram que no ensaio de MTT, observou-se um IC50 de 15,2 µM ± 1,0 para curcumina e 57,0 µM ± 2,0 para a oxaliplatina. Quando avaliado a combinação da curcumina com oxaliplatina, obteve-se um IC50 de 3,2 µM ± 0,2, indicando que há um efeito de potencialização do efeito da oxaliplatina. O Ensaio de Formação de Colônias celulares mostrou que quando a curcumina é utilizada de forma combinada com a oxaliplatina, não há formação de colônias. Isto sugere que o efeito de potencialização da oxaliplatina se mantém, levando a um dano tardio. A análise de morte celular por apoptose demonstrou que quando utilizada de forma isolada, a oxaliplatina leva o dobro de células a morte celular por apoptose, quando comparado com células não tratadas. Quando utilizada a combinação, observou-se uma queda no percentual de células em apoptose, indicando que a curcumina apresenta um efeito protetor de apoptose. Em conjunto nossos dados demonstram um efeito potencializador da curcumina sobre a oxaliplatina, mas este efeito parece não estar associado com a indução de apoptose.

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