A tuberculose (TB) é uma doença infecto-contagiosa causada por Mycobacterium tuberculosis que representa um sério problema de saúde pública no mundo. O tratamento da TB consiste em uma associação de fármacos, principalmente rifampicina (RMP) e isoniazida (INH) por um período de no mínimo seis meses. O aumento de cepas resistentes a esses fármacos é preocupante, uma vez que são poucos os fármacos disponíveis. A resistência a INH e RMP está relacionada a mutações específicas em diferentes genes. Cerca de 95% das cepas resistentes a RMP possuem mutações, inserções ou deleções dentro de uma região de 81 pb do gene rpoB que codifica a sub-unidade β da RNA polimerase, resultando na inibição da transcrição. A  resistência à INH está relacionada a diferentes genes envolvidos com a síntese de ácidos micólicos da parede celular. A maioria das mutações são nos genes katG, principalmente no códon  315 (Ser → Thr) e na região regulatoria C (-15) T do gene  inhA. O tratamento da tuberculose causada por cepas resistente seria mais eficaz se fosse baseado em testes de suscetibilidade da bactéria aos fármacos. No entanto, os métodos microbiológicos são  laboriosos  e demorados, sendo comum ter que aguardar até mais de quatro semanas para obtenção do resultado. Por esta razão, este trabalho teve o objetivo de analisar a presença de mutações em regiões de DNA de M. tuberculosis envolvidas com essa resistência através de hibridização com sondas para os genes katG,  rpoB e inhA. As sondas eram fixadas em membrana de náilon para  hibridizar  com  o  produto  de  um  PCR multiplex realizado com primers específicos. A hibridização era detectada através de um sistema enzimático que formava um precipitado de cor púrpura. Os DNAs testados foram extraídos diretamente de escarro de pacientes diagnosticados com TB no município de Canoas e os resultados comparados com o teste de microbiológico. Até o momento, a análise dos DNAs por essa metodologia identificou corretamente o perfil de susceptibilidade das cepas.  Os resultados ainda preliminares, mas promissores, indicam a possibilidade de utilizar esta metodologia como uma  alternativa  para  a  identificação  rápida  de resistência aos antimicrobianos utilizado no tratamento da TB.